Kit de testare a acidului nucleic SARS-CoV-2

Utilizarea prevăzută:

Kitul de testare a acidului nucleic SARS-CoV-2 se aplică la detectarea calitativă a acidului nucleic al COVID-19 în tampoane nazofaringiene, tampoane orofaringiene și spută. Rezultatele testelor oferă o bază de diagnostic molecular pentru infecție sau pentru pacienții suspectați și nu trebuie utilizate ca unic criteriu pentru diagnosticul clinic.

Materiale:

Procedura de testare:

A. Pregătirea probei

ARN-ul extras este materialul de pornire pentru trusa de testare a acidului nucleic SARS-CoV-2.

Important: Fiecare procedură de extracție a acidului nucleic trebuie efectuată simultan cu un control pozitiv (40 μL, diluat cu soluții saline sterile/PBS la volumul dorit) și un control negativ (40 μL, diluare cu soluții saline sterile/PBS la volumul dorit).

Se recomandă utilizarea următoarelor kituri comerciale de extracție a acidului nucleic: Mini Kit PureLinkTM Viral ARN/DNA (Invitrogen); Kit ARN Viral Mini (QIAGEN); Kit TIANamp Hi-DNA/ARN (TIANGEN);

B. Configurarea amestecului de reacție

1. Toți reactivii și probele trebuie dezghețați complet, amestecați complet și centrifugați pentru scurt timp la temperatura camerei (interval aproximativ 18 până la 25 de grade) înainte de utilizare.

2. Pregătiți volumul necesar de amestec de reacție într-un tub de microcentrifugă din polipropilenă de dimensiuni adecvate.

3. Se pipetează 25 µL de amestec de reacție în fiecare godeu necesar al unei plăci de reacție 96-optice adecvate sau într-un tub de reacție optic adecvat.

C. Adăugarea șablonului

1. Adăugați 5 μL de ARN extras din probe/control pozitiv/control negativ. Volumul total este de 30 μL.

2. Amestecați bine probele și controalele cu amestecul de reacție prin pipetare în sus și în jos/Vortex.

3. Închideți 96-placa de reacție a godeului cu capace adecvate sau film adeziv optic și tuburile de reacție cu capace adecvate.

4. Centrifugați placa de reacție 96-godeu într-o centrifugă cu un rotor al plăcii de microtitrare timp de 30 de secunde la aproximativ 2500 rpm.

D. Programarea instrumentului PCR în timp real

Pentru informații de bază privind configurarea și programarea diferitelor instrumente PCR în timp real, vă rugăm să consultați manualul de utilizare al instrumentului respectiv. Testul a fost optimizat pentru sistemul ABI7500 Real-Time PCR. Executarea PCR este efectuată în condiții de ciclism, așa cum este descris în tabelul de mai jos.

Definiți detectoarele de fluorescență

* Vă rugăm să setați referința internă de fluorescență a instrumentului la „Niciuna”, de exemplu: Pentru instrumentele din seria ABI setați „Referință pasivă” la „Niciuna”.

E. Analiza datelor

Vă rugăm să setați parametrii de analiză și să analizați datele conform instrucțiunilor de operare ale instrumentelor relevante.

Luați ca exemplu ABI 7500:

Linia de bază ar trebui să fie setată la un interval care elimină fluorescența de fundal găsită în ciclurile timpurii de amplificare, dar care nu se suprapune cu zona în care semnalele de amplificare se ridică deasupra fundalului (Valoare de început: 3~10; Valoare de final: {{2} }). Pragul ciclului (Ct) ar trebui să fie la baza fazei exponențiale. Faceți clic pe „Analiză” pentru a obține automat rezultatul analizei și citiți rezultatul detectării în fereastra „Raport”.

Tag-uri populare: sars - cov-2 nucleic acid test trusa, China, furnizori, producători, fabrică, vrac